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病原學檢測
發布日期:2015-2-28  點擊次數:229

  藍耳病在我國各省市普遍流行,臨床癥狀與豬瘟、偽狂犬、豬細小病毒病、豬乙型腦炎、豬弓形體病等癥狀相似,僅從臨床癥狀及大體剖檢病變很難進行確診,必須依賴實驗室檢測。用于病原學檢測的方法主要有病毒分離鑒定、核酸探針技術、RT-PCR檢測和免疫組化方法。目前RT-PCR已有商品化試劑盒可供操作,在大型養殖企業的實驗室中正逐步發揮敏感、特異及時確診的作用,在該病突發時,能夠做到快速診斷及時采取措施,從而最大限度的降低損失。
  隨著病毒核酸提取技術的不斷改進,RT-PCR試劑盒操作的快捷性能也在不斷提升,目前商品化試劑盒已經由異硫氰酸胍法提取病毒RNA、 Tripoli方法提取病毒RNA逐步轉變為利用心柱內硅基質膜提取,省去了繁雜的步驟和對離心機等設備的較高要求,越來越為基層實驗室提供了應用的便利。另外,對于進行大量監測和深入研究工作的實驗室,為了提高工作效率、最大程度的降低污染的可能性、對病毒核酸含量進行量化,實時熒光RT-PCR試劑盒是首要的選擇。北京世紀元亨動物防疫技術有限公司,正是基于以上原因,積極研制開發了豬繁殖與呼吸綜合征病毒(通用型、變異型)柱式提取改良的普通 RT-PCR試劑盒和豬繁殖與呼吸綜合征病毒(通用型、變異型)柱式提取熒光RT-PCR試劑盒。使用者應結合自己的實際工作需要和實驗室基礎設施配備情況進行選擇使用普通RT-PCR方法或實時熒光RT-PCR方法;根據以下介紹選擇選擇不用類型的檢測試劑盒:
  1、豬繁殖與呼吸綜合征病毒RT-PCR診斷試劑盒(通用型)。
  豬繁殖與呼吸綜合征病毒(PRRSV)反轉錄聚合酶鏈反應(RT-PCR),用于檢測豬血清、精液和組織中的PRRSV,適用于PRRSV的檢測、診斷和流行病學調查。
  2、豬繁殖與呼吸綜合征病毒RT-PCR診斷試劑盒(變異株)。
  本試劑采用RT-PCR方法檢測豬肺、腦等臟器組織和血清中的PRRSV(Nsp2 1594-1680變異株)的RNA,適用于PRRSV(Nsp2 1594-1680變異株)的診斷、檢測和流行病學調查。
  3、血清學檢測
  對送檢的5份血清,以豬藍耳病乳膠凝集診斷試劑盒進行血清學檢測。取豬藍耳病抗原50微升滴于潔凈載被片上,再滴上待檢血清50微升,充分混勻,涂成直徑為1.5~2厘米的圓面,1~3分鐘后觀察結果。如出現肉眼可見的凝集現象(白色小點),可判斷為陽性,無凝集反應、渾濁,判斷為陰性。結果血清抗體陽性率為80%。

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